EIによる神経剤に関連するホスホン酸の誘導体化剤としてのベンジルトリクロロアセトイミデート

Scientific Reports volume 12、記事番号: 21299 (2022) この記事を引用

918 アクセス

1 オルトメトリック

メトリクスの詳細

中性、塩基性、および弱酸性条件下でのホスホン酸性神経ガスマーカーのベンジル化のためのベンジルトリクロロアセトイミデートの使用について説明します。 ベンジル由来のホスホン酸は、電子イオン化ガスクロマトグラフィー質量分析法 (EI-GC-MS) によって検出および分析されました。 この研究で使用されたホスホン酸には、エチル-、シクロヘキシル-、およびピナコリルメチルホスホン酸、神経剤からの初回通過加水分解生成物、それぞれエチル N-2-ジイソプロピルアミノエチル メチルホスホノチオレート (VX)、シクロサリン (GF)、およびソマン (GD) が含まれていました。 ベンジル化の反応パラメーターの最適化には、反応時間、溶媒、温度、触媒酸の有無の影響が含まれます。 特にベンジル化のためのホスホン酸の誘導体化の最適化条件には、アセトニトリル中で混合物を 60 °C に加熱するために中性および触媒酸 (< 5 mol%) と過剰のベンジル 2,2,2-トリクロロアセトイミデートが含まれていました。 4時間。 この方法の中性条件はホスホン酸の p-メトキシベンジルエステルの調製には効率的であることが判明しましたが、酸触媒プロセスではベンジル対応物と比較して生成物の収率がはるかに低いようです。 このメソッドの効率は、化学兵器禁止機関 (OPCW) で取り上げられている土壌マトリックス中に約 5 μg/g の濃度で存在するピナコリル メチルホスホン酸 (PMPA) の誘導体化とベンジル エステルとしての同定に成功することでテストされました。第44回技能試験（PT）。 さらに、このプロトコルは、第 38 回 OPCW-PT で取り上げられた、脂肪酸が豊富な液体マトリックスに約 10 μg/mL の濃度で添加された場合の PMPA の検出と同定にも使用されました。 PMPA のベンジル誘導体は、機器の内部 NIST スペクトル ライブラリおよび OPCW 中央分析データベース (OCAD v.21_2019) によって部分的に裏付けられましたが、合成された本物の標準との比較を通じて明確に同定されました。 ベンジルおよび p-メトキシベンジル ピナコリル メチルホスホン酸のメソッドの MDL (LOD) 値はそれぞれ 35 ng/mL と 63 ng/mL であると測定され、一方、メソッドの定量限界 (LOQ) はそれぞれ 104 ng/mL と 189 ng/mL であると測定されました。 OPCW-PT土壌マトリックスで評価しました。

最近、世界中で成功または失敗した暗殺計画において有機リン系神経剤（OPNA）が意図的に使用されたことにより、これらの致死性化学物質に対する医学的対抗策の開発に向けた研究努力が復活しています4、5、6。 、それらを除染するための方法7、8、およびさまざまな分析方法によるそれらの分析および検出のためのより効果的な代替方法9、10。 OPNA の傘下では、G シリーズおよび V シリーズのエージェントは、歴史的に軍事紛争の内外で最も一般的に使用されているエージェントの 1 つです。 民間標的に対するサリンの使用を示す 3 つの重要な世界的出来事は、東京の地下鉄攻撃におけるサリンの使用 11,12、シリアのグータ化学攻撃 13,14、およびクアラルンプール空港での金正男暗殺における VX の使用です。マレーシアで15. 神経ガスは周囲温度では液体であるため、機器内で高温にさらされると揮発するため、GC-MS 手段ではそのままの形で検出できます。 さて、一部の神経ガスは他の神経ガスよりも顕著な安定性プロファイルを享受していますが、これらすべてが塩基性または酸化条件下で分解するメカニズムはかなり予測可能です16。 その結果、G および V シリーズに属するすべての OPNA は、G ベースの薬剤の PF (例、GD、GF) または P-CN (例、GA) 結合の切断を特徴とする加水分解を受けますが、そのほとんどはV シリーズ薬剤 (VX、VR など) の加水分解経路には、P-S 結合の切断が関与します 16、17、18。 加水分解イベントはメチルホスホン酸ハーフエステルの形成をもたらしますが、これは神経剤との直接の関係により、GC-MS による化学戦争分析分野でも最も研究されている種の 19,20 (図 1a) となります。さまざまな分析方法による OPNA の化学的帰属特徴分析と同様です 21、22、23、24。 しかし、これらの加水分解生成物の直接検出は揮発性が低いため困難であり、シリル化 25,26 やメチル化 27,28,29,30 およびベンジル化 31,32 の形でのアルキル化など、誘導体化のためのいくつかの方法が開発されています。 これらの方法は、GC-MS および OPNA 分解生成物分析の分野で不可欠な化学ツールであることが証明されており、そのため、GC-MS 分析を成功させるための効率的な誘導体化剤の開発に向けた数多くの研究が行われてきました 16。 特にベンジル化は、ホスホン酸の主要な誘導体化反応となっており、ホスホン酸の分子量が高くなり、カラム内での保持時間が長くなり、揮発性も向上する付加物が得られます33。 ベンジル基を導入するための確立された方法では、塩基（通常は炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム）を使用してホスホン酸を脱プロトン化し、続いて70℃で一晩加熱しながらハロゲン化ベンジル（臭化ベンジルなど）と反応させます34（図）。 .1b)。 この反応は効率的であり、対象となる別の化学兵器に関連する可能性のあるマトリックス中に存在する塩基感受性種を扱う際に問題を引き起こす可能性がある塩基性条件下ではうまく機能します。 この目的のために、中性または弱酸性条件を含むホスホン酸のベンジル化のプロトコールは、分析者にホスホン酸にベンジル部分を導入する別の方法を提供する可能性があります。 ここで紹介する方法では、OPNAに関連するホスホン酸のベンジルエステルの形成に、ベンジル-およびp-メトキシベンジル-2,2,2-トリクロロアセトイミデートという2つの試薬を使用します（図1c）。

(a) 有機リン系神経剤 VX、GD、GB を加水分解して、それぞれエチルメチルホスホン酸 (EMPA)、ピナコリルメチルホスホン酸 (PMPA)、シクロヘキシルメチルホスホン酸 (CMPA) を生成します。 ホスホン酸のベンジル化では、(b) 塩基の存在下で臭化ベンジルを使用し、(c) 中性、塩基性、または酸性条件下でベンジルおよび p-メトキシベンジルトリクロロアセトイミド酸を使用します。

メチル化 35、36、37 やベンジル化などのアルキル化の形での誘導体化は、天然の形ではこの技術でわずかに検出できる種の GC-MS による分析で一般的に行われています。 これら 2 つのアルキル化反応は最も注目を集めているため、NIST38,39 や OPCW 中央分析データベース (OCAD)40 などのほとんどの機器ライブラリーが、日常業務で重要なメチル化およびベンジル化ホスホン酸の大規模なコレクションを蓄積していることは驚くべきことではありません。これらの神経剤の分解生成物の実際のケースシナリオの特定。 一般に、その後の GC-MS 法による分析のためのホスホン酸のベンジル化は、塩基性条件下でハロゲン化ベンジル (臭化ベンジルや臭化ペンタフルオロベンジルなど) を使用して行われます 33,41,42。 このような場合に使用される塩基は、本質的に有機または無機であり、どちらも良好な収率でベンジル化ホスホン酸種の形成につながります。 炭酸カリウムなどの無機塩基を使用する追加の利点は、誘導体化中に通常過剰に使用されるため、重要なシグナルを妨害する可能性があるトリエチルアミンなどの有機塩基とは対照的に、よりクリーンな質量スペクトルが得られることです。 ベンジル基を導入する代替方法として、我々はベンジル トリクロロアセトイミデート 43,44 に注目しました。これは、基質のベンジル化において臭化ベンジルと同様の反応ができるベンジル アルコールの活性化型ですが、この場合は中性から酸性の条件下で行われます。 トリクロロアセトイミデートのもう 1 つの魅力的な特徴は、ほとんどの場合、周囲温度で安定した液体であるため、固体の計量が不要になるため、誘導体化での使用が便利であることです。 この研究での研究のために選択された 3 つのホスホン酸は、エチル、シクロヘキシル、およびピナコリル メチルホスホン酸で、神経剤であるエチル N-2-ジイソプロピルアミノエチル メチルホスホノチオレート (VX)、シクロサリン (GF)、およびソマン (GD) の加水分解生成物です。それぞれ。

ホスホン酸の誘導体化にベンジル トリクロロアセトイミデートを使用する可能性を実証するための最初のステップの 1 つは、反応に最適な条件を見つけることでした。 他の誘導体化プロトコル (BSTFA 媒介シリル化など) と同様の条件 (ACN/60 °C/2 時間) を使用して誘導体化の実現可能性を判断した後、反応温度が最初に評価されるパラメーターとなりました。 この反応では、評価した各ホスホン酸の生成物が 60 °C で実行されたときに最も多く生成されることがわかりましたが、各ホスホン酸の相当量のベンジル エステル生成物は 40 °C でも同様に蓄積することがわかりました (図 2a)。 2時間の設定時間で。 温度 (60 °C) が 2 時間だけ反応を行った場合に反応に最適であると判断された後、各ホスホン酸に対する各ベンジルエステルの時間に対する反応収率が決定されました。 最適化のために評価された時間は、2、4、6、および 8 時間でした。 この反応により、4時間後に各ホスホン酸に対して有意なベンジルエステル生成物が生成され、これらの生成物の蓄積は、その後反応時間を延長しても（最大8時間）大幅な増加は見られないことが判明した（図2b）。 したがって、このデータは、最初の GC 分析は誘導体化開始から 4 時間という早い時点で実行でき、分析物の濃度に応じて、誘導体化の収率を高めるために誘導体化に長時間 (最大 8 時間) 適用できることを示しています。ベンジル化ホスホン酸。 これら最初の 2 つのパラメーター (温度と時間) が最適化された後、反応に使用される溶媒の影響と、中性、塩基性、および触媒酸を添加した条件下で反応を行うことの影響を評価することに注意を向けました。 最適化のために設定された最後の 2 つのパラメーターには、PMPA のみが含まれていました。 したがって、ベンジル化反応をテストした溶媒には、ジクロロメタン (DCM、沸点: 40 °C)、アセトニトリル (沸点: 82 °C)、アセトン (沸点: 56 °C)、および酢酸エチル (EtOAc、沸点: 77 °C)。 PMPA のベンジル化は、DCM と EtOAc とは対照的に、アセトニトリルとアセトンを溶媒として使用すると、より効率的に進行することが観察されました。DCM と EtOAc では、以前に発表された結果を反映して、ベンジルエステルの収率が明らかに低いことが判明しました 27 (図 2c)。 それにもかかわらず、これらの他の溶媒中では、生成物の顕著な形成が依然として観察された。 これらのデータから、酸添加剤および塩基の不在および使用を伴うパラメーター最適化反応の最後のセット中に、アセトニトリル中で反応を行うことが決定されました。 PMPAのベンジル化は、塩基性条件下でスムーズに機能し、触媒酸を添加した場合（トリクロロアセトイミデートに対して5モル％）、および添加剤が方程式に含まれていない場合と同等の量のBPMPAを生成することがわかりました（図2d）。 混合物に添加剤が入っていない状態は中性と呼ばれますが、酸や塩基が存在しない場合でも、ホスホン酸自体が単独で存在するため、混合物は本質的に酸性です。 したがって、ホスホン酸は、酸添加剤の外側でベンジル化の触媒として機能することができると想像できます（図2e）。 最終的に、このプロトコルは、機器の内部 NIST ライブラリーおよび OCAD ライブラリーで見つかる 3 つのベンジル化生成物を生成します。これらは、保持時間とともに、ベンジルエチルメチルホスホン酸 BEMPA (t = 19.15 分)、ベンジルピナコリルメチルホスホン酸です。酸 BPMPA (t = 22.42 および 22.69 分) およびベンジル シクロヘキシル メチルホスホン酸 BCMPA (t = 25.26 分)

最適化反応、アセトニトリル (ACN、ACN、 (a) 誘導体化に対する温度の影響は、穏やかな加熱 (40 °C) と 60 °C で 4 時間の加熱で同様の結果が得られます。 (b) 3 つのベンジル化生成物の最大蓄積が約 4 時間で観察される反応時間。 (c) PMPA のみに関する研究では、アセトニトリルとアセトンが DCM と EtOAc での誘導体化に最適な溶媒であることが明らかになりました。 (d) 添加剤なし (「中性」)、塩基 (20 mg、過剰)、および触媒酸 (TFA および AcOH、0.08 μmol (ホスホン酸に対して 10 mol%)) が反応に及ぼす影響は、反応がすべての条件下で良好に機能することを示しています。これらの条件；(e) 酸も塩基も添加しない場合の、ホスホン酸がトリクロロアセトイミデートの活性化種として作用する、提案された反応機構。

私たちの研究に含まれた別のトリクロロアセトイミデートは、p-メトキシベンジルトリクロロアセトイミデートでした。 p-メトキシベンジルトリクロロアセトイミデートとホスホン酸との反応は、ベンジルトリクロロアセトイミデートについて説明したものと同じ機構を介して起こります（図2e）が、得られるホスホン酸エステルは、芳香環にメトキシ置換基を有するベンジル単位で構成されます。 この他のトリクロロアセトイミデートを研究する理由は、p-メトキシベンジル (PMB) 部分を使用して、その電子捕獲能力により非置換ベンジル対応物と比較してホスホン酸の検出を強化できる可能性があるためです33。 しかし、この環置換により p-メトキシベンジル基が弱酸に対して不安定になるため 43,44、反応をある程度成功させるには塩基の使用が必要になります。 この特定の誘導体化から生じる 3 つの生成物と括弧内の保持時間は、p-メトキシベンジル エチル メチルホスホン酸 PMB-EMPA (t = 22.77 分)、p-メトキシベンジル ピナコリル メチルホスホン酸 PMB-PMPA (t = 25.57 および 25.85 分) です。 .) および p-メトキシベンジル シクロヘキシル メチルホスホン酸 PMB-CMPA (t = 28.23 分)。 図 3a ～ c​​ の結果から、温度、時間、溶媒の関数としてのホスホン酸への p-メトキシベンジル基の導入は、対応するベンジル トリクロロアセトイミデートによって示されるものと非常によく似ていることが観察できます (図 2) 基本条件下。 したがって、p-メトキシベンジル化は、40℃で4時間後にベンジル化ホスホン酸のかなりの収率を提供すると思われます（図3a、b）が、温度の上昇（つまり、60℃）または反応時間の延長によりわずかに収率が向上します（図3a、b）。最大8時間）。 さまざまな溶媒での反応のパフォーマンスに関して、アセトニトリルとアセトンが誘導体化を行うのに最適な媒体であることが再びわかりました。 最後に、図 3d でわかるように、対応するベンジル基と比較した p-メトキシベンジル基の酸不安定性は、反応の収率に悪影響を及ぼします。 したがって、媒体は本質的にすでに酸性であり、いくらかのp-メトキシベンジルPMPAは検出できますが、この量は酸の加水分解効果を打ち消すために塩基（Na2CO3）を過剰に添加した場合と比較して、最小限の値です（図3d）。

p-メトキシベンジル トリクロロアセトイミデートによるホスホン酸の誘導体化: 最適化反応、酸 (0.8 μmol、[100 ppm]) をアセトニトリル (ACN、1 mL) 中のトリクロロアセトイミデート (200 μL、過剰)、(a) 穏やかな加熱 (40 °C) および 60 °C で 4 時間の加熱で同様の結果が得られる誘導体化に対する温度の影響。 (b) 3 つの p-メトキシベンジル化酸の最大蓄積が約 4 時間で観察される反応時間。 (c) PMPA のみに関する研究により、ACN とアセトンが誘導体化に最適な溶媒であることが明らかになりました。 (d) 添加剤なし (「中性」)、塩基 (20 mg、過剰)、および触媒酸 (TFA および AcOH、0.08 μmol (ホスホン酸に対して 10 mol%)) が反応に及ぼす影響は、反応がうまく機能することだけを示しています。おそらくPMBグループのより酸に敏感な性質のため、塩基性条件下では。

両方の PMPA 誘導体の質量スペクトル比較は、この重要な神経剤分解マーカーの分析において分析者を大いに助ける、それらの独特の構造構成を反映する非常に興味深い特徴を示します (図 4)。 両方のベンジル化 PMPA 化合物に関連する保持時間から始めて、PMB-PMPA の保持時間は 25.57 分と 25.85 分であり (図 4a)、BPMPA の保持時間は 22.42 分と 22.69 分であり、大きく異なることが観察できます。分。 予想通り、PMPA 誘導体の GC-MS プロファイルは、酸のジアステレオマー混合物から生じる 2 つのシグナルとして現れます 28,29。 PMB-PMPA の質量スペクトルの分析では、2 つの重要な特徴が示されています。1 つ目は、分子イオンのピーク (m/z = 300.3) がはっきりと見えること、およびベース ピークはメトキシ置換トロピリウムに割り当てられた m/z = 121.1 であることです。カチオン（図4b）。 PMB-PMPA のスペクトルにおけるその他の興味深いピークには、ピナコリル部分のアルキル側鎖が失われ、PMB 置換ホスホン酸 (C9H13O4P) が生成されるフラグメントである m/z = 216.1 のピークが含まれます。 m/z = 137.1は、C8H9O2の暫定的な式を有するPMB-PMPAのPMB-O側ユニットに属します（図4b）。 対照的に、BPMPA の質量スペクトルにはピークがほとんどありませんが、そのうちの 2 つは非常に強力です (図 4d)。 1 つ目はベース ピーク (m/z = 186.1) で、ピナコリル部分のアルキル側鎖が失われ、ベンジル置換ホスホン酸 (C8H11O3P) が生成されるフラグメントであり、m/z = 91.1 です。はトロピリウムイオンの生成を示します。 EI-GC-MS 分析中に予想されたように、一部の誘導体の分子イオンピークは観察されない場合があり、これは BPMPA (m/z = 270) の場合に当てはまります (図 4d)。

PMB-PMPA および BPMPA の GC-MS トレースと関連する質量スペクトル。 GC-MS データは合成標準に基づいて収集されました。 分子内の 2 つの立体中心、アスタリスク (*) でマークされたピナコリル アーム内の P 原子と C 原子の結果として、カラムによる PMPA の両方のジアステレオマーの分離に注目してください。

ピナコリル メチルホスホン酸は、神経ガスであるソマン (GD) の最初の分解生成物であり、それが発見される環境または生物学的条件によっては、メチルホスホン酸に加えて、この神経ガスから生じる最も豊富な種となる可能性があります。 ソマンは G シリーズに属する神経剤で、酵素アセチルコリンエステラーゼ (AChE) に結合すると老化時間が最も短く、すでに毒性の強い神経剤の中で最も致死性の高い神経剤の 1 つとなっています 45。 この致命的な特徴とは別に、誘導体化された形の GD および PMPA は GC-MS 分析中に独特の挙動を示し、これらの分析物はジアステレオマー混合物として存在するため、常に 2 つのシグナルが観察されます 28,29。 GD は 2 つのキラル中心 (C 中心と P 中心) を持つ G シリーズの唯一の神経剤であるため、これは独特の特性であり、そのため OPCW 技能試験 (PT) で常に注目される分析物となっています。 OPCW-PT 中の主な目標は、化学兵器関連の分解生成物を最終的に検出および特定することです。 これらの PT では、検体を検出するだけでなく、そのクロマトグラフィー保持時間と質量スペクトルを、天然型か誘導体型かに関係なく既知の参照化学物質の質量スペクトルと比較することにより、明確に同定することが重要です46。

したがって、ホスホン酸を対応するベンジルエステルに変換するこの方法の能力を実証した後、我々は、第 44 回 OPCW-PT35 で取り上げられた土壌サンプルでのその性能のテストに注目しました。 コード PT-S2 で指定された PT 土壌サンプルは、そのマトリックス内に報告対象化合物ピナコリルメチルホスホン酸 (PMPA、スケジュール 2.B.04) を含んでおり、後にこれが 50 μg/g の濃度で添加されていることが判明した。 土壌サンプルは、ブランクサンプルとして参加研究室に提供された土壌マトリックスと混合され、5 μg/g の濃度で PMPA を含む PT-S2* と呼ばれる希釈サンプルが生成されました。 土壌サンプル PT-S2 には、GC-MS で検出可能な有機物が含まれている以外に、おそらく PT 分析中に干渉種として作用すると考えられる一連の同種炭化水素も添加されていました。 プロトコールは、土壌マトリックス PT-S2* を ACN (2 mL) に溶解し、その懸濁液を Na2CO3 (20 mg) および 2,2,2-トリクロロアセトイミデート ベンジル (40 μL) で同時に処理することから構成されていました。 得られた混合物をヒートブロックで 4 時間加熱し、濾過し、ACN 濾液を窒素流で約 150 μL まで濃縮し、GC-MS で分析しました。 図５ａからわかるように、ＰＭＰＡがこのような低濃度（５μｇ／ｇ）である場合、最適化されたプロトコルを使用したＢＰＭＰＡの形成が観察され得る。 さまざまな土壌干渉の中で突出しているピークのいずれか 1 つから生じる質量スペクトルを注意深く分析すると、実際、これらのピークはベンジル化 PMPA 生成物から生じていることがわかります (図 5b)。 このマトリックスのベンジルおよび p-メトキシベンジル ピナコリル メチルホスホン酸のメソッドの MDL 値は、EPA によって確立されたガイドライン (EPA-821-R16-006) に従って、それぞれ 35 ng/mL および 63 ng/mL であると測定されました。 さらに、同じガイドラインを使用して、ベンジルピナコリルメチルホスホン酸と p-メトキシベンジルピナコリルメチルホスホン酸の両方のメソッドの LOQ は、それぞれ 104 ng/mL と 189 ng/mL と決定されました (表 1)。

濃度約 5 μg/g の PMPA を含む土壌サンプル PT-S2* の GC-MS 分析。 (a) ベンジル生成物 BPMPA の生成を示すガスクロマトグラム (両方の星印で示す)。 (b) BPMPA の質量スペクトル。

この方法は、第 38 回 OPCW-PT28 で取り上げられた、脂肪酸が豊富な液体マトリックス中での PMPA のベンジル化効率についてテストされました。 2015 年に実施されたこの PT で取り上げられた液体サンプル (コード: CW-O3) は、脂肪酸が豊富なマトリックスにスパイクされたメチルホスホン酸とは別に、PMPA のもう一方の末端加水分解生成物であるピナコリル アルコール 47,48 を含む多くの予定された化学物質で構成されていました。分析と特定が非常に困難になりました。 シリル化およびメチル化を含む誘導体化アプローチは、溶出溶媒としてシリカゲルおよびヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィーによるマトリックスの事前精製を含む、限られた成功強制努力で実施されました。 ここでの我々の研究では、このマトリックスに PMPA を約 10 μg/mL の濃度でスパイクしました。 スパイクしたマトリックスを過剰のベンジルトリクロロアセトイミデートで60℃で4時間処理すると、BPMPAが形成されました（図6）。 興味深いことに、我々の装置の NIST 内部ライブラリは BPMPA との明確な一致を提供できず、その質量スペクトルは非常によく似た類似体である n-ブチルベンジルホスホン酸 (BBPA) の質量スペクトルと一致しました (BBPA との一致スコア = 759 (49%))。 これは、機器の内部ライブラリ検索を使用したときに一致する化合物が得られなかった対応する PMB-PMPA とはまったく対照的です 39。

～ 10 μg/mL の濃度で PMPA を添加した脂肪酸が豊富なマトリックス CW-O3 の GC-MS 分析。 (a) ベンジル 2,2,2-トリクロロアセトイミデートとの反応後の CW-7-6-6-03 マトリックスの GC クロマトグラム。 選択したイオンを抽出した後でも、マトリックス内の多数の干渉により、生成物 BPMPA の明確なシグナルは観察できません (m/z = 91、186; 挿入図)。 (b) 図 5a 挿入図の赤い点線で示された領域の質量分析により、BPMPA の質量スペクトルが得られます。

すべての化学薬品は商業供給者から購入し、受け取ったまま使用しました。エチル メチルホスホン酸 (EMPA)、シクロヘキシル メチルホスホン酸 (CMPA)、ピナコリル メチルホスホン酸 (PMPA)、ベンジル 2,2,2-トリクロロアセトイミデート、4-メトキシベンジル-2,2、 ２－トリクロロアセトイミデート、アセトニトリル（ＡＣＮ）、アセトン、酢酸エチルおよびジクロロメタンは、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から購入した。 重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、および無水硫酸ナトリウムは、Acros Organics (ペンシルベニア州ウエストチェスター) から購入しました。 重水素化クロロホルム (CDCl3) は、Alfa Aesar (Ward Hill, MA) から購入しました。 Acrodisc PTFE シリンジ フィルター (0.45 μm) は、ポール ラボラトリーズ (ポート ワシントン、ニューヨーク州) から購入しました。 オートサンプラーのバイアルとガラスインサートは、Agilent Technologies (カリフォルニア州サンタクララ) から購入しました。 土壌サンプル PT-S2 と液体マトリックス CW-O3 は、ローレンス リバモア国立研究所 (LLNL) の法医学科学センター (FSC) OPCW-PT サンプル アーカイブから入手しました。

PMPA の原液 (1 mg/mL、1000 ppm) を DCM (10 mL) で調製し、この溶液を土壌サンプル (コード: PT-S2) と脂肪酸が豊富な液体サンプル (コード: PT-S2) のスパイクに使用しました。コード：CW-O3）。 原液は冷蔵庫 (4 °C) に保管し、マトリックスの希​​釈またはスパイクに使用する場合にのみ取り出しました。 土壌サンプルは次のように調製しました。土壌 PT-S2 (200 mg) を PMPA (原液 10 μL、0.01 mg) で処理し、混合物を DCM (1 mL) で懸濁し、ボルテックスして均一にスパイクされたことを確認しました。土壌サンプル。 ＤＣＭを穏やかな窒素流で蒸発させて、５μｇ／ｇの濃度でＰＭＰＡを含む土壌サンプルを得た。 液体サンプルは次のように調製しました。液体 CW-O3 (200 μL) を DCM (200 μL) で希釈し、PMPA (ストック溶液 40 μL、0.04 mg) で処理して、10 μg の PMPA をスパイクした液体マトリックスを提供しました。 /mLの濃度。

スプリット/スプリットレス インジェクターを備えた 5975 MS 検出器を備えた 6890 Agilent GC を、スプリットレス モードでの分析に使用しました。 分析に使用した GC カラムは、Agilent DB-5MS キャピラリー カラム (30 m × 内径 0.25 mm × 膜厚 0.25 μm) でした。 超高純度ヘリウムをキャリアガスとして 0.8 mL/min で使用しました。 インジェクター温度は 250 °C、注入量は 1 μL でした。 オーブン温度プログラムは次のとおりです。40 °C、3 分間保持、8 °C/分で 300 °C まで上昇、3 分間保持。 MS イオン源と四重極の温度はそれぞれ 230 °C と 150 °C でした。 電子イオン化は、イオン化エネルギー 70 eV で使用されました。 MS は、0.4 秒で m/z 29 から m/z 600 までスキャンするように操作されました。 溶媒遅延は 3.5 分です。 前述したように28。

スペクトルは、Bruker TCI 5 mm 凍結プローブ (Bruker Biospin、マサチューセッツ州ビレリカ) を備えた Bruker Avance III 600 MHz 機器を使用し、30.0 ± 0.1 °C で取得しました。 １Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ）、１３Ｃ／１３Ｃ（ＤＥＰＴ−１３５）ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ）および３１Ｐ／３１Ｐ｛１Ｈ｝ＮＭＲをＣＤＣｌ３中で記録した。 NMR データは次のように報告されます。化学シフト (δ) (100 万分の 1、ppm)。 多重度: d (ダブレット)、app ten (見かけのテンテット)、qd (ダブレットのカルテット)。 結合定数 (J) はヘルツ (Hz) で与えられます。 1H NMR 化学シフトは、7.26 ppm を中心とする残留 CHCl3 一重項に関して校正されますが、13 C NMR では、CDCl3 からの 77.16 ppm を中心とする三重項がスペクトル校正に使用されました。

合成中に使用した溶媒は、Ｂｕｃｈｉ加熱浴Ｂ－４９０を備え、ＫＮＦ Ｌａｂｏｐｏｒｔ Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ ＵＮ８２０真空ポンプに接続されたＢｕｃｈｉロータリーエバポレーターＲ－２００を使用して除去した。 分析薄層クロマトグラフィー (TLC) は、モリブデン酸アンモニウムセリウム (CAM) による検出と組み合わせて、Agela Technologies シリカゲル ガラス プレート上で実施され 49,50,51、ヨウ素蒸気および/または UV 光 (λ = 254 nm) への曝露 52,53 が行われました。 、54、55。 ベンジル化標準物質の精製は、UV 検出システム (λ = 245、365 nm) に接続されたシリカゲル カートリッジを使用する Biotage Purification System を使用して実行されました。 HRMS 分析は、ローレンス リバモア国立研究所の法医学センターで化学イオン化 (CI) を使用して取得されました。 ピナコリルメチルホスホン酸ベンジル: ピナコリルメチルホスホン酸 (150 mg、0.83 mmol) を DMF (5 mL) に溶解し、炭酸ナトリウム (160 mg、1.51 mmol、酸に対して 1.83 当量) および 2,2,2-トリクロロアセトイミド酸ベンジルで順次処理しました。 (183μL、0.99mmol、1.2当量)。 一晩撹拌した後、水(5 mL)をシンチレーションバイアルに加え、有機相を抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、シリンジフィルターディスクに通し、真空中で蒸発させて黄色の油を得て、これをフラッシュカラムで精製した。クロマトグラフィー（ヘキサン→７：３ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により、ベンジルピナコリルメチルホスホネートを無色の油状物として得た（１８４ｍｇ、８２％）。 1H NMR (ジアステレオマー混合物: 1.5:1 (maj = メジャー; min = マイナー、600 MHz、CDCl3) δ 5.11 (dd、J = 11.9、8.0 Hz、1Hmaj)、5.06 (dd、J = 11.9、8.1 Hz、1Hmin) )、5.04 (dd、J = 16.9、8.4 Hz、1Hmaj)、5.01 (dd、J = 17.0、8.3 Hz、1Hmin)、4.26 (dq、J = 8.3、6.4 Hz、1Hmin)、4.19 (dq、J = 8.3、6.4 Hz、1Hmaj)、1.46 (d、J = 3.9 Hz、3Hmin)、1.43 (d、J = 3.8 Hz、3Hmaj)、1.26 (d、J = 6.3 Hz、3Hmaj)、1.23 (d、J = 6.3 Hz、3Hmin)、0.90 (s、9Hmin)、0.89 (s、9Hmaj); 13C NMR (150 MHz、CDCl3) δ 136.57、136.54、136.50、128.48、128.19、127.68、127.67、81.3 6、81.30、81.14、81.09 、66.94、66.90、66.71、66.68、34.89、34.87、34.85、34.83、25.52、25.51、17.03、16.86、12.99、12.14、12.02、11.17; 31P{1H} NMR (242 MHz、CDCl3) δ 30.50、29.81; 31P NMR δ 30.49 (約 10、J = 8.4 Hz、Pmin)、29.80 (約 10、J = 8.4 Hz、Pmaj); C14H23O3P [M+] の HRMS (CI) m/z 計算値: 270.1385; 実測値 270.1401。メチルホスホン酸ピナコリル: 反応はベンジル対応物の反応と同様でしたが、p-メトキシベンジル トリクロロアセトイミデート (205 μL、0.99 mmol) を使用した点が唯一の違いでした。 フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン→７：３ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製後、ｐ－メトキシベンジルピナコリルメチルホスホネート生成物を無色の油として得た（１５９ｍｇ、６４％）。 1H NMR (ジアステレオマー混合物、600 MHz、CDCl3) δ 7.32 (d、J = 8.2 Hz、2H)、6.89 (d、J = 8.2 Hz、2H)、5.07–4.92 (m、2Hmaj、min)、4.25 (dq) 、J = 8.3、6.3 Hz、1Hmaj)、4.18 (dq、J = 8.3、6.3 Hz、1Hmin)、3.80 (s、OCH3、3Hmaj、min)、1.44 (d、J = 4.4 Hz、3Hmaj)、1.41 ( d、J = 4.3 Hz、3Hmin)、1.27 (d、J = 6.4 Hz、3Hmin)、1.24 (d、J = 6.4 Hz、3Hmaj)、0.91 (s、9Hmaj)、0.89 (s、9Hmin); 13C NMR (150 MHz、CDCl3) δ 159.67、130.02、129.64、129.62、128.84、128.80、128.74、128.70、113.93、81.24、81.19、81.03、80.98、66 .86、66.81、66.64、66.60、55.27、34.93、34.91、34.89 、34.87、25.58、17.07、16.90、13.14、12.30。 ３１Ｐ｛１Ｈ｝ＮＭＲ（２４２ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ３０．３７、２９．６６； ３１Ｐ ＮＭＲδ ３０．３６（約１０、Ｊ＝８．３Ｈｚ、Ｐｍａｊ）、２９．６６（約１０、Ｊ＝８．３Ｈｚ、Ｐｍｉｎ）； C15H25O4P の HRMS (CI) m/z 計算値 [M.+]: 300.1490; 300.1497が見つかりました。 これら 2 つのベンジル化 PMPA 標準のスペクトル データは、サポート情報に提供されています。

中性、塩基性および弱酸性条件下でのホスホン酸神経ガスマーカーの誘導体化のためのベンジル-および p-メトキシベンジルトリクロロアセトイミデートの使用が評価されています。 使用されたホスホン酸には、エチル、シクロヘキシル、ピナコリル メチルホスホン酸が含まれており、それぞれ神経剤であるエチル N-2-ジイソプロピルアミノエチル メチルホスホノチオレート (VX)、シクロサリン (GF)、およびソマン (GD) の代表的な加水分解生成物に相当します。 ホスホン酸の誘導体化の最適化条件には、中性酸、塩基性酸、および触媒酸 (< 5 mol%) と過剰のトリクロロアセトイミデートを組み合わせ、混合物をアセトニトリル中で 60 °C で 4 時間加熱するという条件が含まれていました。 比較研究により、ホスホン酸のベンジル化は 3 つの条件 (中性、酸性、塩基性) すべてでスムーズに進行する一方、これらの p-メトキシベンジル化は塩基 (Na2CO3 など) の存在下でのみ効率的に機能することがわかりました。 これは、穏やかな酸性から高度な酸性条件下での p-メトキシ ベンジル基の不安定性と一致します。 この方法の効率は、第 44 回 OPCW-PT で取り上げられた土壌サンプル中に約 5 μg/g の濃度で存在するピナコリル メチルホスホン酸 (PMPA) の誘導体化とそのベンジル エステルとしての同定に成功することでテストされました。 さらに、このプロトコルは、第 38 回 OPCW-PT で特集された脂肪酸が豊富な液体マトリックスに約 10 μg/mL の濃度で添加された場合の PMPA の検出と同定にも使用されました。 PMPA のベンジル誘導体は、装置の内部 NIST スペクトル ライブラリまたは OPCW 中央分析データベース (OCAD v.21_2019)、および当社の研究室で合成された本物の標準によって裏付けられました。 第 44 回 OPCW-PT (補足情報) で取り上げられた土壌抽出物中のベンジルおよび p-メトキシベンジル ピナコリル メチルホスホン酸について計算された MDL 値は、それぞれ 35 ng/g および 63 ng/g であると測定されました。

この研究中に生成または分析されたすべてのデータは、この公開された論文とその補足情報ファイルに含まれています。

チャイ、PR、ボイヤー、EW、アルナハス、H. & エリクソン、TB 暗殺と戦争用の有毒化学兵器: 神経剤 VX とサリン。 有毒。 共通。 1、21–23 (2007)。

記事 Google Scholar

ストーン、R. 英国の襲撃により、神経剤が脚光を浴びる。 サイエンス 359、1314–1315 (2018)。

記事 ADS CAS Google Scholar

Stone, R. ドイツの軍事科学者がアレクセイ・ナワリヌイ氏の攻撃に使用された神経剤をどのように特定した可能性があるのか​​。 科学 https://doi.org/10.1126/science.abe6561 (2020)。

記事 Google Scholar

Thiermann, H.、Worek, F. & Kehe, K. 急性化学兵器中毒の治療における限界と課題。 化学。 バイオル。 交流する。 206、435–443 (2013)。

記事 CAS Google Scholar

Worek, F.、Thiermann, H. & Wille, T. 有機リン酸塩中毒におけるオキシム: 60 年間の希望と絶望。 化学。 バイオル。 交流する。 259、93–98 (2016)。

記事 CAS Google Scholar

ベニオン、BJ 他神経剤曝露に対するCNS透過性再活性化因子の開発：反復的で学際的なアプローチ。 科学。 議員 11、15567 (2021)。

記事 ADS CAS Google Scholar

Kim, K.、Tsay, OG、Atwood, DA & Churchill, DG 化学兵器の破壊と検出。 化学。 Rev. 111、5345–5403 (2011)。

記事 CAS Google Scholar

Mayer, BP、Valdez, CA、Hok, S.、Chinn, SC & Hart, BR 化学兵器剤およびその分解生成物に関連する有機リン化合物のスペクトル単離および同定のための 31P 編集拡散秩序 1H NMR 分光法。 アナル。 化学。 84、10478–10484 (2012)。

記事 CAS Google Scholar

ブラック、RM、クラーク、RJ、リード、RW & リード、MTJ ガスクロマトグラフィー質量分析法およびガスクロマトグラフィータンデム質量分析法の、神経剤サリン、イオウマスタードの残留物が含まれていることが判明した化学戦争サンプルの分析への応用それらの分解生成物。 Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． A. 662、301–321 (1994)。

記事 CAS Google Scholar

ペンシルバニア州ダゴスティーノ、JR ハンコックおよびCL シェニエ 土壌および合成サンプル中の化学兵器およびその分解生成物の質量分析。 ユーロ。 Ｊ．マススペクトル。 9、609–618 (2003)。

記事 Google Scholar

Tu, AT オウム真理教の化学・生物兵器：サリン以上のもの。 法医学。 改訂 26、115–120 (2014)。

CAS Google スカラー

奥村 徹 ほか地下鉄サリン事件―教訓。 有毒。 応用薬理学。 207、471–476 (2005)。

記事 CAS Google Scholar

ドルギン、E. シリアのガス攻撃により、より優れた抗サリン薬の必要性が強化されました。 ナット。 医学。 19、1194–1195 (2013)。

記事 Google Scholar

Butler, D. 英国とシリアでの攻撃は、化学法医学の専門知識の必要性が高まっていることを浮き彫りにしています。 Nature 556、285–286 (2018)。

記事 ADS CAS Google Scholar

Tu, A. テロエージェントとしての VX の使用: 日本のオウム真理教による行為とマレーシアでの金正男氏の死: 4 つのケーススタディ。 グロブ。 セキュリティ健康科学ポリシー。 5、48–56 (2020)。

記事 Google Scholar

カリフォルニア州バルディーズおよびRN レイフ ガスクロマトグラフィー質量分析 (GC-MS) による有機リンベースの神経剤分解生成物の分析: 分析化学者のツールボックスにある現在の誘導体化反応。 分子 26、4631。https://doi.org/10.3390/molecules26154631 (2021)。

記事 CAS Google Scholar

Dawson, RM、Pantelidis, S.、Rose, HR & Kotsonis, SE 有機リン酸塩分解剤 (OpdA) による神経ガスの分解。 J.ハザード・メーター。 157、308–314 (2008)。

記事 CAS Google Scholar

ヤン、Y.-C. 神経剤 VX の化学的解毒。 準拠化学。 解像度 32、109–115 (1999)。

記事 CAS Google Scholar

Valdez, CA、Leif, RN、Hok, S. & Hart, BR ガスクロマトグラフィー質量分析による化学兵器の分析: 分解生成物の分析のための化学兵器の直接検出および誘導体化アプローチの方法。 アナル牧師。 化学。 37、1-26。 https://doi.org/10.1515/revac-2017-0007 (2018)。

記事 CAS Google Scholar

Black, RM & Muir, B. 化学兵器およびその分解生成物のクロマトグラフィー分析における誘導体化反応。 Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． A 1000、253–281 (2003)。

記事 CAS Google Scholar

Jansson、D. et al. パート 2: 液体クロマトグラフィー質量分析法を使用した、食品中のロシアの VX の法医学的帰属プロファイリング。 タランタ 186、597–606 (2018)。

記事 CAS Google Scholar

Holmgren、KH et al. パート 1: 化学帰属署名の多変量統計によるロシアの VX の合成経路の追跡。 タランタ 186、586–596 (2018)。

記事 CAS Google Scholar

ウィリアムズ、AM et al. パート 3: ロシアン VX の固相抽出と食品マトリックス中のその化学的帰属サイン、および GC-MS および LC-MS によるそれらの検出。 タランタ 186、607–614 (2018)。

記事 CAS Google Scholar

オーブン、SPB et al. NMR、GC-MS、LC-HRMS を使用した、保存されている VX 神経剤の化学的帰属サインの特定。 タランタ 211、120753 (2020)。

記事 CAS Google Scholar

ウェブスター、RL et al. GC-MS、LC-MS、NMR を使用した化学法医学プロファイリングと神経剤サリンの帰属署名の決定。 アナル。 バイオアナル。 化学。 https://doi.org/10.1007/s00216-022-04027-1 (2022)。

記事 Google Scholar

Richardson, DD & Caruso, JA ICPMS および TOF-MS 検出によるガスクロマトグラフィー用の有機リン神経剤分解生成物の誘導体化。 アナル。 バイオアナル。 化学。 388、809–823 (2007)。

記事 CAS Google Scholar

本宿 正 他ガスクロマトグラフィー質量分析によるヒト血清中のグリホサート、グリホサート代謝産物、およびグルホシネートの測定。 Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． B アナル。 テクノロジー。 バイオメッド。 生命科学。 875、509–514 (2008)。

記事 CAS Google Scholar

Valdez, CA、Leif, RN & Alcaraz, A. ガスクロマトグラフィー質量分析による定性検出のための、トリメチルオキソニウムテトラフルオロボレートを介した化学兵器に関連するホスホン酸の効果的なメチル化と同定。 アナル。 チム。 アクタ。 933、134–143 (2016)。

記事 CAS Google Scholar

Valdez, CA、Marchioretto, MK、Leif, RN & Hok, S. EI-GC-MS および GC- FPD。 法医学。 内部。 288、159–168 (2018)。

記事 CAS Google Scholar

Macomber、RS ジアゾメタンによるホスホン酸のエステル化。 シンセ。 共通。 7、405–407 (1977)。

記事 CAS Google Scholar

Amphaisri, K.、Palit, M. & Mallard, G. 現場分析のための化学兵器条約の予定酸の熱支援メチル化とそれに続くシリル化、および他のメチル化方法との比較。 Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． A. 1218、972–980 (2011)。

記事 CAS Google Scholar

Halket, J. & Zaikin, V. 質量分析における誘導体化—3。 アルキル化（アリール化）。 ユーロ。 Ｊ．マススペクトル。 10、1–19 (2004)。

記事 CAS Google Scholar

Palit, M.、Gupta, AK、Jain, R. & Raza, SK ガスクロマトグラフィー質量分析によるホスホン酸およびホスホノチオ酸のペンタフルオロベンジル誘導体の定量。 Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． A. 1043、275–284 (2004)。

記事 CAS Google Scholar

Knapp、DR 分析誘導体化反応ハンドブック、第 1 版。 （ワイリー、1979）。

Google スカラー

カリフォルニア州ヴァルディーズら。 EI-GC-MS を使用して、土壌中の低レベルで神経剤サリン、ソマン、シクロサリンの指標マーカーであるイソプロピル、ピナコリル、シクロヘキシルメチルホスホン酸を遡及的に検出するためのメチル化プロトコル。 科学。 トータル環境。 683、175–184 (2019)。

記事 ADS CAS Google Scholar

van't Erve、TJ、Rautiainen、RH、Robertson、LW & Luthe、G. トリメチルシリルジアゾメタン: GC アプリケーションにおけるフェノール誘導体化用の、安全で非爆発性、コスト効率が高く、毒性の低い試薬。 環境。 内部。 36、835–842 (2010)。

記事 Google Scholar

Pagliano, E. GC-MS および LC-MS の多用途誘導体化: 無機陰イオン、化学兵器の分解生成物、有機酸、およびプロテオーム分析のためのトリアルキルオキソニウム テトラフルオロボレートによるアルキル化。 アナル。 バイオアナル。 化学。 412、1963 ～ 1971 年 (2020)。

記事 CAS Google Scholar

標準参照データ プログラム、国立標準技術研究所、メリーランド州ゲイサーズバーグ。 標準参照データベース IA (2011) http://www.nist.gov/srd/nist1a.htm。

Valdez, CA、Leif, RN、Hok, S. & Alcaraz, A. ルーチン GC-MS 分析中の NIST ライブラリの信頼性の評価: 5,5-ジフェニル-1,3-ジオキソラン-4 の構造およびスペクトル データの裏付け-最近の OPCW 技能試験中の 1 回。 Ｊ．マススペクトル。 53、419–422 (2018)。

記事 ADS CAS Google Scholar

Nyanyira, C. OPCW 中央分析データベース、化学兵器禁止条約化学物質分析: サンプル収集、調製および分析方法 (Mesilaakso, M.編) 133–149 (Wiley、2005)。

大塚 M.、柘植 K.、瀬戸 Y.、宮口 宏、内山 M. ペンタフルオロベンジル化後の液体クロマトグラフィー - タンデム質量分析による神経剤の分解生成物の分析。 Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． A. 1577、31–37 (2018)。

記事 CAS Google Scholar

Hamachi, A.、Imasaka, T.、nakamakura, H.、Li, A. & Imasaka, T. 紫外線フェムト秒レーザーイオン化質量分析による神経ガス代謝産物の測定。 アナル。 化学。 89、5030–5035 (2017)。

記事 CAS Google Scholar

Iversen, T. & Bundle, DR ベンジル トリクロロアセトイミデート、酸触媒によるヒドロキシ基のベンジル化のための多用途試薬。 Ｊ．Ｃｈｅｍ． 社会化学。 共通。 23、1240–1241 (1981)。

記事 Google Scholar

Eckenberg, P.、Groth, U.、Huhn, T.、Richter, N. & Schmeck, C. アルコールのベンジル化におけるベンジル トリクロロアセトイミデートの有用な応用。 Tetrahedron 49、1619–1624 (1993)。

記事 CAS Google Scholar

ストーン、R. 神経剤を倒す方法。 サイエンス 359、23 (2018)。

記事 ADS CAS Google Scholar

ブルーム、M.-M. & Murty、MRVS 分析化学と化学兵器禁止条約。 アナル。 バイオアナル。 化学。 406、5067–5069 (2014)。

記事 CAS Google Scholar

カリフォルニア州ヴァルディーズら。 GC-MS によるグリセロールに富むマトリックス中のピナコリル アルコールの分析における成功した誘導体化戦略としてのアシル化: OPCW 技能試験での応用。 アナル。 バイオアナル。 化学。 413、3145–3151 (2021)。

記事 CAS Google Scholar

Albo, RLF、Valdez, CA、Leif, RN、Mulcahy, HA & Koester, C. ガスクロマトグラフィー質量分析による検出を強化するためのフェニルジメチルクロロシランによるピナコリルアルコールの誘導体化。 アナル。 バイオアナル。 化学。 406、5231–5234 (2014)。

記事 CAS Google Scholar

Wnuk、SF et al. 二重に認証されたアデノシンのジハロビニルおよびアセチレン類似体。 合成、S-アデノシル-1-ホモシステインヒドロラーゼとの相互作用、および抗ウイルス効果および細胞増殖抑制効果。 J.Med. 化学。 43、1180–1186 (2000)。

記事 CAS Google Scholar

Wnuk、SF et al. アデノシンおよびウリジンの糖修飾共役ジエン類似体。 合成、S-アデノシル-1-ホモシステインヒドロラーゼとの相互作用、および抗ウイルス効果および細胞増殖抑制効果。 J.Med. 化学。 45、2651–2658 (2002)。

記事 CAS Google Scholar

ショーウォルター、BM et al. アノマー置換反応における脱離基としてのジアゼニウムジオレート イオン: イオン性ジアゼニウムジオレートの保護-脱保護戦略。 混雑する。 化学。 社会 127、14188–14189 (2005)。

記事 CAS Google Scholar

カリフォルニア州ヴァルディーズら。 5-ニトロイミダゾールの2-エテニルおよび2-エタニル誘導体の合成と電気化学、およびランブル鞭毛虫に対する抗菌活性。 J.Med. 化学。 52、4038–4053 (2009)。

記事 CAS Google Scholar

Abramson, D. & Blecher, M. 天然リン脂質の定量的二次元薄層クロマトグラフィー。 Ｊ．リピッド． 解像度 5、628–630 (1964)。

記事 CAS Google Scholar

Barrett, GC ペーパークロマトグラフィーおよび薄層クロマトグラフィーにおける「非破壊的」発色試薬としてのヨウ素。 ネイチャー 194、1171–1172 (1962)。

記事 ADS CAS Google Scholar

カリフォルニア州ヴァルディーズら。 O2 グリコシル化ジアゼニウムジオレート ファミリーの潜在的なプロドラッグ間の加水分解反応性の傾向。 抗イシュマニア活性のために一酸化窒素をマクロファージに標的化する。 J.Med. 化学。 51、3961–3970 (2008)。

記事 CAS Google Scholar

リファレンスをダウンロードする

この文書 (LLNL-JRNL-841699) は、米国政府機関の支援による研究報告として作成されました。 米国政府、ローレンス リバモア ナショナル セキュリティ LLC、およびその従業員は、明示的か黙示的かを問わず、いかなる情報、装置、製品、またはサービスの正確性、完全性、または有用性についていかなる保証もせず、法的責任や責任を負いません。プロセスが開示されているか、その使用が私有権を侵害しないことを表明しています。 ここでの商号、商標、製造業者などによる特定の商業製品、プロセス、またはサービスへの言及は、必ずしも米国政府またはローレンス リバモア ナショナル セキュリティ LLC による承認、推奨、または支持を構成または暗示するものではありません。 ここで表明されている著者の見解や意見は、必ずしも米国政府またはローレンス リバモア ナショナル セキュリティ LLC の見解や意見を述べたり反映したりするものではなく、広告や製品の推奨目的に使用されるものではありません。

この研究は、米国エネルギー省の後援の下、契約 DE-AC52-07NA27344 に基づいてローレンス リバモア国立研究所によって実施されました。

米国カリフォルニア州リバモア、ローレンス・リバモア国立研究所、法医学科学センター

アラグ・スブラマニアン、ホセ・A・ロサレス、ロアルド・N・レイフ、カルロス・A・バルデス

米国カリフォルニア州リバモア、ローレンス・リバモア国立研究所、核化学科学部門

アラグ・スブラマニアン、ロアルド・N・リーフ、カルロス・A・バルデス

ローレンス・リバモア国立研究所、生物科学およびバイオテクノロジー部門、米国カリフォルニア州リバモア

アラグ・スブラマニアン

NNSA-MSIIP サマーフェロー、テキサス大学、エルパソ、テキサス州、米国

ホセ・A・ロサレス

グローバルセキュリティ総局、ローレンス・リバモア国立研究所、米国カリフォルニア州リバモア

ホセ・A・ロサレス、ロアルド・N・レイフ、カルロス・A・バルデス

ローレンス・リバモア国立研究所、7000 East Avenue、L-090、リバモア、CA、94550、米国

カルロス・A・バルデス

PubMed Google Scholar でこの著者を検索することもできます

PubMed Google Scholar でこの著者を検索することもできます

PubMed Google Scholar でこの著者を検索することもできます

PubMed Google Scholar でこの著者を検索することもできます

AS と RNL は EI-GC-MS 分析を実施しました。 JAR は、プロジェクトで使用される標準物質の合成と NMR 実験を実施しました。 CAV は主要な原稿テキストを書き、図を作成しました。 著者全員が原稿をレビューしました。

カルロス・A・バルデスへの通信。

著者らは競合する利害関係を宣言していません。

シュプリンガー ネイチャーは、発行された地図および所属機関における管轄権の主張に関して中立を保ちます。

オープン アクセス この記事はクリエイティブ コモンズ表示 4.0 国際ライセンスに基づいてライセンスされており、元の著者と情報源に適切なクレジットを表示する限り、あらゆる媒体または形式での使用、共有、翻案、配布、複製が許可されます。クリエイティブ コモンズ ライセンスへのリンクを提供し、変更が加えられたかどうかを示します。 この記事内の画像またはその他のサードパーティ素材は、素材のクレジットラインに別段の記載がない限り、記事のクリエイティブ コモンズ ライセンスに含まれています。 素材が記事のクリエイティブ コモンズ ライセンスに含まれておらず、意図した使用が法的規制で許可されていない場合、または許可されている使用を超えている場合は、著作権所有者から直接許可を得る必要があります。 このライセンスのコピーを表示するには、http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ にアクセスしてください。

転載と許可

Subramanian、A.、Rosales、JA、Leif、RN 他。 OPCW 技能試験シナリオ中の EI-GC-MS による、神経剤に関連するホスホン酸の誘導体化剤としてのベンジル トリクロロアセトイミデート。 Sci Rep 12、21299 (2022)。 https://doi.org/10.1038/s41598-022-25710-4

引用をダウンロード

受信日: 2022 年 10 月 14 日

受理日: 2022 年 12 月 2 日

公開日: 2022 年 12 月 9 日

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-25710-4

次のリンクを共有すると、誰でもこのコンテンツを読むことができます。

申し訳ございませんが、現在この記事の共有リンクは利用できません。

Springer Nature SharedIt コンテンツ共有イニシアチブによって提供

コメントを送信すると、利用規約とコミュニティ ガイドラインに従うことに同意したことになります。 虐待的なもの、または当社の規約やガイドラインに準拠していないものを見つけた場合は、不適切としてフラグを立ててください。